Sintetik pestisidlərin geniş istifadəsi davamlı orqanizmlərin yaranması, ətraf mühitin deqradasiyası və insan sağlamlığına zərər də daxil olmaqla bir çox problemlərə səbəb olmuşdur.Ona görə də insan sağlamlığı və ətraf mühit üçün təhlükəsiz olan yeni mikrob pestisidlərinə təcili ehtiyac var.Bu tədqiqatda Enterobacter cloacae SJ2 tərəfindən istehsal olunan ramnolipid biosurfaktant ağcaqanad (Culex quinquefasciatus) və termit (Odontotermes obesus) sürfələrinə toksikliyi qiymətləndirmək üçün istifadə edilmişdir.Nəticələr müalicələr arasında dozadan asılı ölüm nisbətinin olduğunu göstərdi.Termit və ağcaqanad sürfələri üçün biosurfaktantlar üçün 48 saatda LC50 (50% öldürücü konsentrasiya) dəyəri qeyri-xətti reqressiya əyrisinin uyğunlaşdırılması metodundan istifadə etməklə müəyyən edilmişdir.Nəticələr göstərdi ki, biosurfaktantın larvisid və antitermit aktivliyinin 48 saatlıq LC50 dəyərləri (95% etibarlılıq intervalı) müvafiq olaraq 26,49 mq/L (25,40-27,57 aralığında) və 33,43 mq/L (31,09-35,68 aralığında) təşkil etmişdir.Histopatoloji müayinəyə əsasən biosurfaktantlarla müalicə sürfə və termitlərin orqanoid toxumalarına ciddi ziyan vurub.Bu tədqiqatın nəticələri göstərir ki, Enterobacter cloacae SJ2 tərəfindən istehsal olunan mikrobial biosurfaktant Cx nəzarəti üçün əla və potensial effektiv vasitədir.quinquefasciatus və O. obesus.
Tropik ölkələrdə çoxlu sayda ağcaqanad yoluxucu xəstəliklər var1.Ağcaqanad yoluxucu xəstəliklərin aktuallığı geniş yayılmışdır.Hər il 400.000-dən çox insan malyariyadan ölür və bəzi böyük şəhərlər dang, sarı qızdırma, çikungunya və Zika kimi ciddi xəstəliklərin epidemiyası ilə üzləşir.2 Vektor yoluxucu xəstəliklər dünyada hər altı infeksiyadan biri ilə əlaqələndirilir və ən çox ağcaqanadlar səbəb olur. əhəmiyyətli hallar3 ,4.Culex, Anopheles və Aedes xəstəliyin ötürülməsi ilə ən çox əlaqəli olan üç ağcaqanad cinsidir5.Aedes aegypti ağcaqanadları tərəfindən ötürülən bir infeksiya olan dang qızdırmasının yayılması son on ildə artıb və ictimai sağlamlıq üçün əhəmiyyətli təhlükə yaradır4,7,8.Ümumdünya Səhiyyə Təşkilatının (ÜST) məlumatına görə, dünya əhalisinin 40%-dən çoxu dang qızdırması riski altındadır və hər il 100-dən çox ölkədə 50-100 milyon yeni yoluxma hadisəsi baş verir9,10,11.Denge qızdırması bütün dünyada yayıldığı üçün böyük ictimai sağlamlıq probleminə çevrilmişdir12,13,14.Afrika Anopheles ağcaqanadları kimi tanınan Anopheles gambiae tropik və subtropik bölgələrdə insan malyariyasının ən mühüm vektorudur15.Qərbi Nil virusu, Sent-Luis ensefaliti, Yapon ensefaliti və atlar və quşların viral infeksiyaları çox vaxt ümumi ev ağcaqanadları adlanan Culex ağcaqanadları tərəfindən ötürülür.Bundan əlavə, onlar həm də bakterial və parazitar xəstəliklərin daşıyıcısıdır16.Dünyada 3000-dən çox termit növü var və onlar 150 milyon ildən artıqdır17.Zərərvericilərin əksəriyyəti torpaqda yaşayır və tərkibində sellüloza olan ağac və ağac məhsulları ilə qidalanır.Hind termiti Odontotermes obesus mühüm məhsullara və plantasiya ağaclarına ciddi ziyan vuran mühüm zərərvericidir18.Kənd təsərrüfatı ərazilərində termitlərin müxtəlif mərhələlərdə invaziyaları müxtəlif bitkilərə, ağac növlərinə və tikinti materiallarına böyük iqtisadi ziyan vura bilər.Termitlər insan sağlamlığı ilə bağlı problemlər də yarada bilər19.
Müasir əczaçılıq və kənd təsərrüfatı sahələrində mikroorqanizmlərə və zərərvericilərə qarşı müqavimət məsələsi mürəkkəbdir20,21.Buna görə də, hər iki şirkət yeni qənaətcil antimikroblar və təhlükəsiz biopestisidlər axtarmalıdır.Sintetik pestisidlər artıq mövcuddur və onların yoluxucu olduğu və qeyri-məqsədli faydalı həşəratları dəf etdiyi göstərilmişdir22.Son illərdə müxtəlif sənaye sahələrində tətbiqi ilə əlaqədar olaraq biosurfaktanlar üzərində tədqiqatlar genişlənmişdir.Biosurfaktantlar kənd təsərrüfatında, torpağın bərpasında, neftin çıxarılmasında, bakteriyaların və həşəratların təmizlənməsində və qida emalında çox faydalı və həyati əhəmiyyət kəsb edir23,24.Biosurfaktantlar və ya mikrob səthi aktiv maddələr sahilyanı yaşayış yerlərində və neftlə çirklənmiş ərazilərdə bakteriya, maya və göbələk kimi mikroorqanizmlər tərəfindən istehsal olunan biosurfaktant kimyəvi maddələrdir25,26.Kimyəvi yolla əldə edilən səthi aktiv maddələr və biosurfaktantlar birbaşa təbii mühitdən alınan iki növdür27.Dəniz yaşayış yerlərindən müxtəlif biosurfaktantlar alınır28,29.Buna görə də alimlər təbii bakteriyalara əsaslanan biosurfaktanların istehsalı üçün yeni texnologiyalar axtarırlar30,31.Belə tədqiqatlardakı nailiyyətlər bu bioloji birləşmələrin ətraf mühitin mühafizəsi üçün əhəmiyyətini nümayiş etdirir32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium və bu bakteriya nəsilləri yaxşı öyrənilmiş nümayəndələrdir23,33.
Geniş tətbiq sahəsinə malik olan biosurfaktanların bir çox növləri var34.Bu birləşmələrin əhəmiyyətli üstünlüyü ondan ibarətdir ki, onlardan bəziləri antibakterial, larvisid və insektisid aktivliyə malikdir.Bu o deməkdir ki, onlardan kənd təsərrüfatı, kimya, əczaçılıq və kosmetika sənayesində istifadə oluna bilər35,36,37,38.Biosurfaktantlar ümumiyyətlə bioloji parçalana bilən və ekoloji cəhətdən faydalı olduğundan, bitkiləri qorumaq üçün zərərvericilərə qarşı inteqrasiya proqramlarında istifadə olunur39.Beləliklə, Enterobacter cloacae SJ2 tərəfindən istehsal olunan mikrob biosurfaktantlarının larvisid və antitermit fəaliyyəti haqqında əsas biliklər əldə edilmişdir.Ramnolipid biosurfaktantlarının müxtəlif konsentrasiyalarına məruz qaldıqda ölüm və histoloji dəyişiklikləri araşdırdıq.Bundan əlavə, mikroyosunlar, dafniyalar və balıqlar üçün kəskin toksikliyi müəyyən etmək üçün geniş istifadə olunan Kəmiyyət Structure-Fəaliyyət (QSAR) kompüter proqramını Ekoloji Struktur-Fəaliyyət (ECOSAR) qiymətləndirdik.
Bu tədqiqatda 30-50 mq/ml arasında dəyişən müxtəlif konsentrasiyalarda təmizlənmiş biosurfaktanların antitermit aktivliyi (toksikliyi) hind termitləri, O. obesus və dördüncü növlərə qarşı sınaqdan keçirilmişdir.Instar Cx sürfələri.Quinquefasciatus ağcaqanadlarının sürfələri.Biosurfaktant LC50 konsentrasiyası 48 saat ərzində O. obesus və Cx-ə qarşı.C. solanacearum.Ağcaqanad sürfələri qeyri-xətti reqressiya əyrisinin uyğunlaşdırılması üsulu ilə müəyyən edilmişdir.Nəticələr göstərdi ki, biosurfaktant konsentrasiyasının artması ilə termit ölümləri artıb.Nəticələr göstərdi ki, biosurfaktant larvisidal aktivliyə (Şəkil 1) və termitlərə qarşı fəaliyyətə (Şəkil 2) malikdir, 48 saatlıq LC50 dəyərləri (95% CI) 26,49 mq/L (25,40 - 27,57) və 33,43 mq/ l (Şəkil 31.09 - 35.68), müvafiq olaraq (Cədvəl 1).Kəskin toksiklik baxımından (48 saat) biosurfaktant sınaqdan keçirilmiş orqanizmlər üçün “zərərli” kimi təsnif edilir.Bu tədqiqatda istehsal olunan biosurfaktant 24-48 saat ərzində məruz qaldıqdan sonra 100% ölümlə əla larvisidal fəaliyyət göstərmişdir.
Larvasidal fəaliyyət üçün LC50 dəyərini hesablayın.Qeyri-xətti reqressiya əyrisinin uyğunluğu (bərk xətt) və nisbi ölüm (%) üçün 95% etibarlılıq intervalı (kölgələnmiş sahə).
Termitlərə qarşı fəaliyyət üçün LC50 dəyərini hesablayın.Qeyri-xətti reqressiya əyrisinin uyğunluğu (bərk xətt) və nisbi ölüm (%) üçün 95% etibarlılıq intervalı (kölgələnmiş sahə).
Təcrübənin sonunda mikroskop altında morfoloji dəyişikliklər və anomaliyalar müşahidə edilmişdir.Nəzarət və müalicə olunan qruplarda 40 dəfə böyüdüldükdə morfoloji dəyişikliklər müşahidə edildi.Şəkil 3-də göstərildiyi kimi, biosurfaktanlarla müalicə olunan sürfələrin əksəriyyətində böyümənin pozulması baş verdi.Şəkil 3a normal Cx göstərir.quinquefasciatus, Şəkil 3b anomal Cx göstərir.Beş nematod sürfəsinə səbəb olur.
Biosurfaktantların subletal (LC50) dozalarının Culex quinquefasciatus sürfələrinin inkişafına təsiri.Normal Cx-in 40× böyütmədə işıq mikroskopiyası şəkli (a).quinquefasciatus (b) Anormal Cx.Beş nematod sürfəsinə səbəb olur.
Bu işdə müalicə olunan sürfələrin (Şəkil 4) və termitlərin (Şəkil 5) histoloji müayinəsi qarın nahiyəsinin azalması və əzələlərin, epitel təbəqələrinin və dərinin zədələnməsi daxil olmaqla bir neçə anormallıq aşkar etdi.orta bağırsaq.Histologiya bu işdə istifadə edilən biosurfaktantın inhibitor fəaliyyətinin mexanizmini aşkar etdi.
Normal müalicə olunmamış 4-cü dövr Cx sürfələrinin histopatologiyası.quinquefasciatus sürfələri (nəzarət: (a,b)) və biosurfaktantla müalicə olunur (müalicə: (c,d)).Oklar müalicə olunan bağırsaq epitelini (epi), nüvələri (n) və əzələləri (mu) göstərir.Bar = 50 µm.
Normal müalicə olunmamış O. obesusun (nəzarət: (a,b)) və müalicə olunan biosurfaktantın (müalicə: (c,d)) histopatologiyası.Oklar müvafiq olaraq bağırsaq epitelini (epi) və əzələni (mu) göstərir.Bar = 50 µm.
Bu tədqiqatda ECOSAR ramnolipid biosurfaktant məhsullarının ilkin istehsalçılar (yaşıl yosunlar), ilkin istehlakçılar (su birələri) və ikincil istehlakçılar (balıqlar) üçün kəskin toksikliyini proqnozlaşdırmaq üçün istifadə edilmişdir.Bu proqram molekulyar quruluşa əsaslanan toksikliyi qiymətləndirmək üçün mürəkkəb kəmiyyət struktur-fəaliyyət birləşmə modellərindən istifadə edir.Model maddələrin su növlərinə kəskin və uzunmüddətli toksikliyini hesablamaq üçün struktur-fəaliyyət (SAR) proqram təminatından istifadə edir.Xüsusilə, Cədvəl 2 bir neçə növ üçün təxmin edilən orta öldürücü konsentrasiyaları (LC50) və orta effektiv konsentrasiyaları (EC50) ümumiləşdirir.Kimyəvi Maddələrin Təsnifatı və Etiketlənməsinin Qlobal Uyğunlaşdırılmış Sistemindən istifadə etməklə şübhəli toksiklik dörd səviyyəyə təsnif edilmişdir (Cədvəl 3).
Vektor yoluxan xəstəliklərə, xüsusilə ağcaqanad və Aedes ağcaqanadlarına qarşı mübarizə.Misirlilər, indi çətin iş 40,41,42,43,44,45,46.Piretroidlər və orqanofosfatlar kimi bəzi kimyəvi cəhətdən mövcud olan pestisidlər müəyyən qədər faydalı olsalar da, şəkərli diabet, reproduktiv pozğunluqlar, nevroloji pozğunluqlar, xərçəng və tənəffüs xəstəlikləri kimi insan sağlamlığı üçün əhəmiyyətli risklər yaradırlar.Üstəlik, zaman keçdikcə bu həşəratlar onlara qarşı davamlı ola bilirlər13,43,48.Beləliklə, effektiv və ekoloji cəhətdən təmiz bioloji mübarizə tədbirləri ağcaqanadlarla mübarizənin daha populyar üsuluna çevriləcəkdir49,50.Benelli51 ağcaqanadların daşıyıcıları ilə erkən mübarizənin şəhər yerlərində daha effektiv olacağını təklif etdi, lakin onlar kənd yerlərində larvisidlərin istifadəsini tövsiyə etmədilər52.Tom və digərləri 53 həmçinin ağcaqanadların yetişməmiş mərhələlərində nəzarət etmənin təhlükəsiz və sadə strategiya olacağını təklif etdilər, çünki onlar nəzarət agentlərinə daha həssasdırlar 54 .
Güclü bir ştam (Enterobacter cloacae SJ2) tərəfindən biosurfaktan istehsalı ardıcıl və perspektivli effektivlik göstərdi.Əvvəlki tədqiqatımız Enterobacter cloacae SJ2-nin fiziki-kimyəvi parametrlərdən istifadə edərək biosurfaktan istehsalını optimallaşdırdığını bildirdi26.Onların araşdırmasına görə, potensial E. cloacae izolatı ilə biosurfaktan istehsalı üçün optimal şərait 36 saat inkubasiya, 150 rpm-də qarışdırma, pH 7,5, 37 °C, duzluluq 1 ppt, karbon mənbəyi kimi 2% qlükoza, 1% maya idi. .ekstrakt 2,61 q/L biosurfaktant əldə etmək üçün azot mənbəyi kimi istifadə edilmişdir.Bundan əlavə, biosurfaktantlar TLC, FTIR və MALDI-TOF-MS istifadə edərək xarakterizə edilmişdir.Bu, ramnolipidin biosurfaktan olduğunu təsdiqlədi.Qlikolipid biosurfaktantları biosurfaktanların digər növlərinin ən intensiv öyrənilmiş sinfidir55.Onlar karbohidrat və lipid hissələrindən, əsasən yağ turşusu zəncirlərindən ibarətdir.Qlikolipidlər arasında əsas nümayəndələr ramnolipid və soforolipiddir56.Ramnolipidlər mono- və ya di-β-hidroksidekanoik turşusu ilə əlaqəli iki ramnoz hissədən ibarətdir 57 .Tibb və əczaçılıq sənayesində ramnolipidlərin istifadəsi yaxşı qurulmuşdur 58 , pestisidlər kimi son istifadələrinə əlavə olaraq 59 .
Biosurfaktantın tənəffüs sifonunun hidrofobik bölgəsi ilə qarşılıqlı əlaqəsi suyun stoma boşluğundan keçməsinə imkan verir və bununla da sürfələrin su mühiti ilə təmasını artırır.Biosurfaktanların olması, uzunluğu səthə yaxın olan traxeyaya da təsir edir, bu da sürfələrin səthə sürünərək nəfəs almasını asanlaşdırır.Nəticədə suyun səthi gərginliyi azalır.Sürfələr suyun səthinə yapışa bilmədiyi üçün çənin dibinə düşür, hidrostatik təzyiqi pozur, nəticədə həddindən artıq enerji sərf olunur və boğularaq ölür38,60.Oxşar nəticələr Bacillus subtilis tərəfindən istehsal olunan biosurfaktantın Ephestia kuehniella-ya qarşı larvisid aktivliyi nümayiş etdirdiyi Ghribi61 tərəfindən də əldə edilmişdir.Eynilə, Cx-nin larvisid fəaliyyəti.Das və Mukherjee23 siklik lipopeptidlərin quinquefasciatus sürfələrinə təsirini də qiymətləndirmişlər.
Bu tədqiqatın nəticələri ramnolipid biosurfaktantlarının Cx-ə qarşı larvisidal fəaliyyətinə aiddir.Quinquefasciatus ağcaqanadlarının öldürülməsi əvvəllər dərc edilmiş nəticələrə uyğundur.Məsələn, Bacillus cinsinin müxtəlif bakteriyaları tərəfindən istehsal olunan surfaktin əsaslı biosurfaktanlar istifadə olunur.və Pseudomonas spp.Bəzi erkən hesabatlar64,65,66 Bacillus subtilis23-dən olan lipopeptid biosurfaktantlarının sürfə öldürücü fəaliyyəti haqqında məlumat verdi.Deepali və başqaları.63, Stenotropomonas maltophilia-dan təcrid olunmuş ramnolipid biosurfaktantının 10 mq/l konsentrasiyada güclü larvisid aktivliyə malik olduğunu müəyyən etdi.Silva və başqaları.67 1 q/L konsentrasiyada ramnolipid biosurfaktantının Ae-yə qarşı larvisid fəaliyyətini bildirdi.Aedes aegypti.Kanakdande və başqaları.68, Bacillus subtilis tərəfindən istehsal olunan lipopeptid biosurfaktantlarının Culex sürfələrində və evkaliptin lipofil fraksiyasına malik termitlərdə ümumi ölümə səbəb olduğunu bildirdi.Eynilə, Masendra et al.69 işçi qarışqa (Cryptotermes cynocephalus Light.) E. xam ekstraktının lipofilik n-heksan və EtOAc fraksiyalarında 61,7% ölüm olduğunu bildirdi.
Parthipan və digərləri 70 malyariya paraziti Plasmodiumun vektoru olan Anopheles Stephensi-yə qarşı Bacillus subtilis A1 və Pseudomonas stutzeri NA3 tərəfindən istehsal olunan lipopeptid biosurfaktantlarının insektisid istifadəsini bildirdilər.Onlar müşahidə ediblər ki, sürfələr və pupalar daha uzun yaşayıb, yumurtlama müddətləri daha qısa olub, steril olublar və biosurfaktanların müxtəlif konsentrasiyaları ilə müalicə edildikdə daha qısa ömürlü olublar.B. subtilis biosurfactant A1-in müşahidə edilən LC50 dəyərləri müxtəlif sürfə halları (yəni I, II, III, IV sürfələr və pupa mərhələləri) üçün müvafiq olaraq 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 və 7.99 mq/L olmuşdur.Müqayisə üçün, Pseudomonas stutzeri NA3-ün sürfə mərhələlərinin I-IV və pupa mərhələləri üçün biosurfaktantlar müvafiq olaraq 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 və 6,99 mq/L olmuşdur.Sağ qalan sürfələrin və pupaların gecikmiş fenologiyasının insektisid müalicəsinin yaratdığı əhəmiyyətli fizioloji və metabolik pozğunluqların nəticəsi olduğu düşünülür71.
Wickerhamomyces anomalus ştammı CCMA 0358 Aedes ağcaqanadlarına qarşı 100% larvisid aktivliyə malik biosurfaktant istehsal edir.aegypti 24 saatlıq interval 38 Silva et al.Pseudomonas aeruginosa-dan günəbaxan yağından karbon mənbəyi kimi istifadə edilən biosurfaktantın 48 saat ərzində sürfələri 100% öldürdüyü göstərilmişdir 67 .Abinaya et al.72 və Pradhan et al.73 həmçinin Bacillus cinsinin bir neçə izolatının istehsal etdiyi səthi aktiv maddələrin larvisid və ya insektisid təsirini nümayiş etdirmişlər.Senthil-Nathan et al tərəfindən əvvəllər dərc edilmiş bir araşdırma.bitki laqonlarına məruz qalan ağcaqanad sürfələrinin 100% -nin ölmə ehtimalı olduğunu müəyyən etdi.74.
İnsektisidlərin həşərat biologiyasına öldürücü təsirinin qiymətləndirilməsi inteqrasiya olunmuş zərərvericilərlə mübarizə proqramları üçün vacibdir, çünki öldürücü dozalar/konsentrasiyalar həşəratları öldürmür, lakin bioloji xüsusiyyətləri pozaraq gələcək nəsillərdə həşərat populyasiyalarını azalda bilər10.Siqueira və başqaları 75 50 ilə 300 mq/ml arasında dəyişən müxtəlif konsentrasiyalarda sınaqdan keçirildikdə ramnolipid biosurfaktantının (300 mq/ml) tam larvisid fəaliyyətini (100% ölüm) müşahidə etmişlər.Aedes aegypti suşlarının sürfə mərhələsi.Onlar ölümə qədər vaxtın və ölümcül konsentrasiyaların sürfələrin sağ qalmasına və üzgüçülük fəaliyyətinə təsirini təhlil ediblər.Bundan əlavə, onlar biosurfaktantın ölümcül konsentrasiyalarına (məsələn, 50 mq/mL və 100 mq/mL) 24-48 saat məruz qaldıqdan sonra üzgüçülük sürətində azalma müşahidə ediblər.Perspektivli ölümcül rolu olan zəhərlərin məruz qalmış zərərvericilərə çoxsaylı zərər vurmaqda daha təsirli olduğu düşünülür76.
Nəticələrimizin histoloji müşahidələri göstərir ki, Enterobacter cloacae SJ2 tərəfindən istehsal olunan biosurfaktantlar ağcaqanad (Cx. quinquefasciatus) və termit (O. obesus) sürfələrinin toxumalarını əhəmiyyətli dərəcədə dəyişir.Oxşar anomaliyalara Anda reyhan yağı preparatları səbəb olub.gambiaes.s və An.arabica Ochola tərəfindən təsvir edilmişdir77.Kamaraj et al.78 də eyni morfoloji anormallıqları An.Stefaninin sürfələri qızıl nanohissəciklərə məruz qalıb.Vasantha-Srinivasan et al.79 həmçinin çoban çantasının efir yağının Aedes albopictusun kamerasını və epitel təbəqələrini ciddi şəkildə zədələdiyini bildirdi.Aedes aegypti.Raghavendran və digərləri ağcaqanad sürfələrinin yerli Penicillium göbələyinin 500 mq/ml miselial ekstraktı ilə müalicə olunduğunu bildirdilər.Ae ciddi histoloji ziyanı göstərir.aegypti və Cx.Ölüm nisbəti 80. Əvvəllər Abinaya et al.An-ın dördüncü dövr sürfələri tədqiq edilmişdir.Stephensi və Ae.aegypti, B. licheniformis ekzopolisakkaridləri ilə müalicə olunan Aedes aegypti-də çoxsaylı histoloji dəyişikliklər aşkar etdi, o cümlədən mədə bağırsaqları, əzələ atrofiyası, sinir kordonunun qanqliyalarının zədələnməsi və qeyri-mütəşəkkilliyi72.Raghavendran və başqalarının fikrincə, P.daleae misel ekstraktı ilə müalicədən sonra sınaqdan keçirilmiş ağcaqanadların (4-cü dövr sürfələri) orta bağırsağın hüceyrələrində bağırsaq lümeninin şişməsi, hüceyrələrarası məzmunun azalması və nüvə degenerasiyası müşahidə edilir81.Ekinezya yarpağı ekstraktı ilə müalicə olunan ağcaqanad sürfələrində də eyni histoloji dəyişikliklər müşahidə olundu, bu da müalicə olunan birləşmələrin insektisid potensialını göstərir50.
ECOSAR proqram təminatının istifadəsi beynəlxalq səviyyədə tanınıb82.Hazırkı tədqiqatlar göstərir ki, ECOSAR biosurfaktantlarının mikroyosunlara (C. vulgaris), balıqlara və su birələrinə (D. magna) kəskin toksikliyi Birləşmiş Millətlər Təşkilatı tərəfindən müəyyən edilmiş “toksiklik” kateqoriyasına aiddir83.ECOSAR ekotoksisite modeli maddələrin kəskin və uzunmüddətli toksikliyini proqnozlaşdırmaq üçün SAR və QSAR-dan istifadə edir və çox vaxt üzvi çirkləndiricilərin toksikliyini proqnozlaşdırmaq üçün istifadə olunur82,84.
Paraformaldehid, natrium fosfat tamponu (pH 7.4) və bu işdə istifadə edilən bütün digər kimyəvi maddələr HiMedia Laboratories, Hindistandan alınıb.
Biosurfaktant istehsalı yeganə karbon mənbəyi kimi 1% xam neft əlavə edilmiş 200 mL steril Bushnell Haas mühitindən ibarət 500 mL Erlenmeyer kolbalarında həyata keçirilmişdir.Enterobacter cloacae SJ2 prekulturası (1.4 × 104 CFU/ml) 7 gün ərzində 37°C, 200 rpm-də orbital çalkalayıcıda əkilmiş və becərilmişdir.İnkubasiya dövründən sonra mədəniyyət mühitini 3400xg-də 20 dəqiqə 4°C-də sentrifuqa etməklə biosurfaktan ekstraksiya edildi və nəticədə yaranan supernatant skrininq məqsədləri üçün istifadə edildi.Optimallaşdırma prosedurları və biosurfaktanların xarakteristikası əvvəlki tədqiqatımızdan qəbul edilmişdir26.
Culex quinquefasciatus sürfələri Dəniz Biologiyasında Təkmil Araşdırmalar Mərkəzindən (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (Hindistan) əldə edilmişdir.Sürfələr 27 ± 2°C temperaturda və 12:12 fotoperiodda (işıq: qaranlıq) deionlaşdırılmış su ilə doldurulmuş plastik qablarda yetişdirilmişdir.Ağcaqanad sürfələri 10%-li qlükoza məhlulu ilə qidalanırdı.
Culex quinquefasciatus sürfələri açıq və qorunmayan septik çənlərdə aşkar edilmişdir.Laboratoriyada sürfələri müəyyən etmək və yetişdirmək üçün standart təsnifat təlimatlarından istifadə edin85.Larvisidal sınaqlar Ümumdünya Səhiyyə Təşkilatının tövsiyələrinə uyğun olaraq həyata keçirilmişdir 86 .SH.Quinquefasciatusun dördüncü dövr sürfələri tutumlarının üçdə ikisi qədər hava boşluğu ilə 25 ml və 50 ml-lik qruplarda qapalı borularda toplanmışdır.Biosurfaktant (0-50 mq/ml) hər bir boruya ayrıca əlavə edildi və 25 °C-də saxlanıldı.Nəzarət borusunda yalnız distillə edilmiş su (50 ml) istifadə edilmişdir.Ölü sürfələr inkubasiya dövründə (12-48 saat) üzgüçülük əlamətləri göstərməyənlər hesab olunurdu 87 .Tənlikdən istifadə edərək sürfələrin ölüm faizini hesablayın.(1)88.
Odontotermitidae ailəsinə Kənd Təsərrüfatı Kampusunda (Annamalai Universiteti, Hindistan) çürümüş loglarda tapılan hind termiti Odontotermes obesus daxildir.Bu biosurfaktantı (0-50 mq/ml) onun zərərli olub-olmadığını müəyyən etmək üçün normal prosedurlardan istifadə edərək yoxlayın.Laminar hava axınında 30 dəqiqə qurudulduqdan sonra Whatman kağızının hər zolağı 30, 40 və ya 50 mq/ml konsentrasiyada biosurfaktantla örtülmüşdür.Əvvəlcədən örtülmüş və örtülməmiş kağız zolaqları sınaqdan keçirilmiş və Petri qabının mərkəzində müqayisə edilmişdir.Hər bir petri qabında otuza yaxın aktiv termit O. obesus var.Nəzarət və sınaq termitlərinə qida mənbəyi kimi yaş kağız verildi.Bütün plitələr inkubasiya dövrü ərzində otaq temperaturunda saxlanıldı.Termitlər 12, 24, 36 və 48 saatdan sonra öldü89,90.Sonra tənlik 1 müxtəlif biosurfaktan konsentrasiyalarında termit ölüm faizini qiymətləndirmək üçün istifadə edilmişdir.(2).
Nümunələr buz üzərində saxlanıldı və 100 ml 0,1 M natrium fosfat tamponu (pH 7,4) olan mikrotubalara qablaşdırıldı və Raciv Qandi adına Akvakultura Mərkəzinin (RGCA) Mərkəzi Akvakultura Patologiya Laboratoriyasına (CAPL) göndərildi.Histologiya Laboratoriyası, Sirkali, Mayiladuturai.Əlavə təhlil üçün rayon, Tamil Nadu, Hindistan.Nümunələr dərhal 48 saat ərzində 37 ° C-də 4% paraformaldehiddə fiksasiya edilmişdir.
Fiksasiya mərhələsindən sonra material üç dəfə 0,1 M natrium fosfat tamponu (pH 7,4) ilə yuyuldu, etanolda mərhələli şəkildə susuzlaşdırıldı və 7 gün ərzində LEICA qatranında isladıldı.Daha sonra maddə qatran və polimerləşdirici ilə doldurulmuş plastik qəlibə yerləşdirilir və sonra maddəni ehtiva edən blok tamamilə polimerləşənə qədər 37 ° C-yə qədər qızdırılan sobaya yerləşdirilir.
Polimerləşmədən sonra bloklar LEICA RM2235 mikrotomundan (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, ABŞ) istifadə edərək 3 mm qalınlığa qədər kəsilmişdir.Bölmələr slaydlarda qruplaşdırılıb, hər slaydda altı bölmə var.Slaydlar otaq temperaturunda qurudulmuş, sonra 7 dəqiqə hematoksilinlə boyanmış və 4 dəqiqə axan su ilə yuyulmuşdur.Bundan əlavə, eozin məhlulunu dəriyə 5 dəqiqə tətbiq edin və 5 dəqiqə axan su ilə yuyun.
Kəskin toksiklik müxtəlif tropik səviyyələrdə yaşayan su orqanizmlərindən istifadə etməklə proqnozlaşdırılıb: 96 saatlıq balıq LC50, 48 saatlıq D. magna LC50 və 96 saatlıq yaşıl yosun EC50.Ramnolipid biosurfaktantlarının balıq və yaşıl yosunlar üçün toksikliyi ABŞ Ətraf Mühitin Mühafizəsi Agentliyi tərəfindən hazırlanmış Windows üçün ECOSAR proqram təminatının 2.2 versiyasından istifadə etməklə qiymətləndirilmişdir.(Onlayn olaraq https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model ünvanında mövcuddur).
Larvasid və antitermit aktivliyinə dair bütün testlər üç nüsxədə aparılmışdır.Sürfə və termit ölüm məlumatlarının qeyri-xətti reqressiyası (doza cavab dəyişənləri jurnalı) 95% etibarlılıq intervalı ilə orta ölümcül konsentrasiyanı (LC50) hesablamaq üçün həyata keçirildi və Prism® (versiya 8.0, GraphPad Software) Inc. istifadə edərək konsentrasiyaya cavab əyriləri yaradıldı. ABŞ) 84, 91.
Bu tədqiqat Enterobacter cloacae SJ2 tərəfindən istehsal olunan mikrob biosurfaktantlarının ağcaqanad larvisid və antitermit agentləri kimi potensialını ortaya qoyur və bu iş larvisid və antitermit təsir mexanizmlərinin daha yaxşı başa düşülməsinə kömək edəcəkdir.Biosurfaktantlarla müalicə olunan sürfələrin histoloji tədqiqatları həzm traktının, orta bağırsağın, beyin qabığının zədələnməsini və bağırsaq epiteliya hüceyrələrinin hiperplaziyasını göstərdi.Nəticələr: Enterobacter cloacae SJ2 tərəfindən istehsal edilən ramnolipid biosurfaktantının antitermit və larvisid aktivliyinin toksikoloji qiymətləndirilməsi bu izolatın ağcaqanadların (Cx quinquefasciatus) və termitlərin (O. obesus) vektor yoluxucu xəstəliklərinə qarşı mübarizə üçün potensial biopestisid olduğunu müəyyən etdi.Biosurfaktantların əsas ekoloji toksikliyini və onların ətraf mühitə potensial təsirlərini başa düşməyə ehtiyac var.Bu tədqiqat biosurfaktanların ekoloji riskini qiymətləndirmək üçün elmi əsas verir.
Göndərmə vaxtı: 09 aprel 2024-cü il